Consejo Superior de Investigaciones Científicas
UNIDAD ASOCIADA "SISTEMAS AGROFORESTALES": ESTACIÓN FITOPATOLÓXICA DO AREEIRO - MISIÓN BIOLÓGICA DE GALICIA
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XXVI Congreso SEBBM. La Coruña 2003

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Comparación de tres protocolos para la extracción de adn a partir de diferente material vegetal de Camellia


Vela, P.; Pais, M.; Aguín, O.; Salinero, M.C.

Excma Diputación Provincial de Pontevedra. Servicio Agrario. Estación Fitopatolóxica do Areeiro. Subida a la Robleda s/n 361533 Pontevedra pmansilla@efa-dip.org





RESUMEN:      El género Camellia se cultiva extensamente en Galicia siendo su presencia muy significativa en jardines tanto públicos como privados. Posee una gran facilidad de hibridación e introgresión lo que ha dificultado la identificación de especies mediante métodos clásicos como caracteres agromorfológicos de la flor y la hoja, tamaño del arbusto, etc. descriptores que se pueden ver influídos por factores ontogénicos y ambientales que enmascaran la diversidad genética real. Las técnicas basadas en el análisis del material genético podrían ser una herramienta eficaz para la diferenciación de especies, híbridos y variedades de Camellia. A este respecto uno de los problemas que plantea este género, como otras especies leñosas, es la dificultad de obtener un ADN óptimo, debido a la presencia de determinados componentes que pueden interferir en el proceso de extracción. Por eso el objetivo del presente trabajo fue investigar que tipo de material vegetal de Camellia y que proceso de extracción permitiría obtener de forma rápida y eficaz ADN para realizar posteriores estudios moleculares. Se seleccionaron plantas de 19 especies de Camellia, cultivadas en Galicia, recogiendo de cada una: yemas, brotes, hojas, capullos y flores. Previamente a la extracción cada tipo de material vegetal se dividió en 3 lotes: 1/3 se congeló, otro se liofilizó y el tercero se mantuvo fresco. Para cada lote se probaron 3 protocolos de extracción basados en kits comerciales. Los resultados indican que el mejor material para la extracción del ADN lo constituye brotes o capullos tanto congelados, liofilizados como frescos aplicando el protocolo del Puregene DNA isolation Kit.